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脑缺血再灌注后神经细胞凋亡与碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的关系
成纤维细胞生长因子受体1单克隆抗体由武汉博士德生物工程有限公司提供。方法：实验于2005—05／12在山东省脑病防治重点实验室完成。①摸球法将大鼠随机分为实验组(n=24)和假手术组(n=4)。应用线栓法经左侧颈外一内动脉插线建立大脑中动脉闭塞再灌注模型，假手术组除不插线外，其余步骤同实验组。实验组大鼠于脑缺血1h再灌注6h、12h、1d、3d、7d、14d各时间点取4只大鼠进行标本取材，假手术组于术后24h取材。大鼠麻醉后断头完整取脑，切取视交叉后方约5mm的脑组织，连续冠状切片备用。②脑组织经苏木精一伊红染色，显微镜下观察大鼠神经细胞形态。~TUNEL法：细胞核出现棕黄色颗粒者为阳性着色，即凋亡细胞。高倍镜下在皮质区和纹状体区随机各取4个视野计数阳性细胞。④标本切片经兔抗大鼠bFGF和FGFR-1单克隆抗体染色，高倍镜下在皮质区和纹状体区随机各取4个视野计数阳性细胞,[link widoczny dla zalogowanych]。主要观察指标：各组大鼠神经细胞凋亡情况及碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体1表达情况。结果：纳入28只大鼠全部进入结果分析。实验组大鼠脑缺血损伤区神经细胞数量明显减少，部分细胞出现核固缩、不规则，染色加深呈紫蓝色，核仁消失，并有许多散在的细胞碎片,[link widoczny dla zalogowanych]。②假手术组脑组织可见少量凋亡神经细胞，脑缺血后凋亡细胞明显增多，主要位于额顶叶皮质区和纹状体区。实验组大鼠缺血再灌注6h皮质区开始凋亡细胞逐渐增多，12h～3d凋亡细胞数较多，其中再灌注1d达高峰，3d开始下降，至14d时仍高于假手术组。纹状体区凋亡细胞的数量和变化趋势与皮质区相近(P>0．05)。⑧假手术组大鼠脑组织神经细胞碱性成纤维细胞生长因子均有微弱表达，阳性细胞数量较少，着色较浅。实验组大鼠脑缺血后神经细胞碱性成纤维细胞生长因子表达增强，主要位于皮质区和纹状体区，实验组大鼠脑缺血再灌注后6h神经元即出现bFGF的表达，随着再灌注时间的延长逐渐增强，阳性细胞增多，着色加深，再灌注1-3d达高峰，之后逐渐减弱，至再灌注14d，皮质区和纹状体区bFGF表达分别为(5．01±1．71)，(5．21±1．62)个，视野，仍高于假手术组[(2．03±1．73),[link widoczny dla zalogowanych]，(2，46_+1．36)个，视野，P<0．05】。(假手术组脑组织可见到少量着色较浅的FGFR·1阳性细胞；脑缺血再灌注6h后皮质区和纹状体区成纤维细胞生长因子受体1阳性细胞数开始增加，至再灌注1—3d最多，3d后阳性细胞逐渐减少，至14d时皮质区和纹状体区成纤维细胞生长因子受体1阳性细胞数分别为(5．01±1．41)，(5．20_+1．33)个，视野，高于假手术组[(2．25_+1．67)，(2．32_+1．61)个，视野，P<0．o5]。结论：脑缺血再灌注后，在皮质区和纹状体区可能通过激活内源性碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体-1的表达,[link widoczny dla zalogowanych]，来抑制神经细胞凋亡，从而发挥神经保护作用。关键词：脑缺血；再灌注；成纤维细胞生长因子，碱性；受体，生长因子中图分类R743文献标识码：A文章编号：1673—8225(2007)14—02776—04丁晓洁，孙峰，王超，郭云良．脑缺血再灌注后神经细胞凋亡与碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的关系[J】．中国组织工程研究与临床康复，2007。11(14)：2776-2779[www．zglckf．comlzglckflejoumallupfilesl07—14114k-2776(ps)．pdf](EditedbyYangGFIYinYL,[link widoczny dla zalogowanych]，WangL)2779
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